Dinitrophenol (DNP) ist ein chemisches Verbindungsprodukt, das als Entkoppler der oxidativen Phosphorylierung wirkt. Es beeinflusst die ATP-Produktion in den Mitochondrien, indem es die Protonenbewegu... [mehr]
Wie beeinflussen Nukleinsäuren die A280-Methode?
AntwortDie Methode A280 bezieht sich auf die Messung der Absorption von Licht bei 280 nm, um die Konzentration von Proteinen in einer Lösung zu bestimmen, da Aromaten wie Tryptophan und Tyrosin in Proteinen bei dieser Wellenlänge absorbieren. Nukleinsäuren, wie DNA und RNA, absorbieren ebenfalls Licht, jedoch bei einer anderen Wellenlänge (260 nm). Wenn Nukleinsäuren in einer Probe vorhanden sind, können sie die A280-Messung beeinflussen, indem sie die Gesamtabsorption erhöhen, was zu einer Überbewertung der Proteinmenge führen kann. Dies geschieht, weil die Absorption von Nukleinsäuren bei 260 nm nicht direkt in die A280-Messung einfließt, aber die Gesamtabsorption der Probe beeinflusst. Daher ist es wichtig, die Konzentration von Nukleinsäuren in der Probe zu berücksichtigen, um genaue Proteinmessungen zu erhalten. Um die Auswirkungen von Nukleinsäuren zu minimieren, kann man die A260/A280-Verhältnisse berechnen, um die Reinheit der Proteinprobe zu beurteilen. Ein Verhältnis von etwa 0,6 bis 0,8 deutet auf eine relativ reine Proteinprobe hin, während niedrigere Werte auf Verunreinigungen durch Nukleinsäuren hinweisen können.
